Peamine erinevus - voolutsütomeetria vs FACS

Rakuteooria kontekstis on rakud kõigi elusorganismide põhiline struktuurne ja funktsionaalne üksus. Rakkude sorteerimine on metoodika, mida kasutatakse erinevate rakkude eraldamiseks vastavalt füsioloogilistele ja morfoloogilistele omadustele. Neil võib olla rakusiseseid või rakuväliseid omadusi. DNA, RNA ja valkude interaktsiooni peetakse rakusiseseks interaktiivseks omaduseks, kuju, suurust ja erinevaid pinnavalke peetakse rakuvälisteks omadusteks. Tänapäevases teaduses on rakusorteerimise metoodikad aidanud kaasa bioloogiliste uuringute erinevale uurimisele ja ka meditsiiniuuringute kaudu uute põhimõtete kehtestamisele. Rakkude sorteerimisel kasutatakse mitmesuguseid metoodikaid, mis hõlmavad nii primitiivseid vähem seadmetega kui ka arenenud tehnoloogilisi metoodikaid keerukate masinate abil. Voolutsütomeetria, fluorestsents-aktiveeritud rakkude sorteerimine (FACS), magnetiliste rakkude valik ja üherakulised sorteerimine on peamised kasutatavad metoodikad. Voolutsütomeetria ja FACS on välja töötatud rakkude eristamiseks vastavalt nende optilistele omadustele. FACS on spetsiaalne voolutsütomeetria tüüp. Voolutsütomeetria on metoodika, mida kasutatakse rakkude heterogeense populatsiooni analüüsimisel vastavalt rakkude erinevatele molekulide pinnale, suurusele ja mahule, mis võimaldab uurida üksikuid rakke. FACS on protsess, mille käigus rakkude proovisegu sorteeritakse vastavalt nende valguse hajumise ja fluorestsentsi omadustele kahte või enamasse mahutisse. See on peamine erinevus voolutsütomeetria ja FACSi vahel.

SISU

1. Ülevaade ja olulisemad erinevused 2. Mis on voolutsütomeetria 3. Mis on FACS 4. Voolutsütomeetria ja FACSi sarnasused 5. Kõrvuti võrdlus - voolu tsütomeetria vs FACS tabelina 6

Mis on voolutsütomeetria?

Voolutsütomeetria on meetod, mida kasutatakse rakusiseste molekulide ja raku pinna ekspressiooni uurimiseks ja määramiseks ning erinevate rakutüüpide määratlemiseks ja iseloomustamiseks. Seda kasutatakse ka raku mahu ja raku suuruse määramiseks ning eraldatud alampopulatsioonide puhtuse hindamiseks. See võimaldab üksikute lahtrite mitmeparameetrilist hindamist umbes samal ajal. Voolutsütomeetriat kasutatakse fluorestsentsi intensiivsuse mõõtmiseks, mis saadakse fluorestsentsmärgistatud antikehade tõttu, mis aitavad tuvastada seotud rakkudega seonduvaid valke või ligande.

Üldiselt hõlmab voolutsütomeetria peamiselt kolme alamsüsteemi. Need on fluidumid, elektroonika ja optika. Voolutsütomeetrias on saadaval viis peamist komponenti, mida kasutatakse rakkude sorteerimisel. Need on vooluhulk (vedelikuvool, mida kasutatakse nende transportimiseks ja elementide joondamiseks optilise anduriprotsessi jaoks), mõõtesüsteem (võivad olla erinevad süsteemid, sealhulgas elavhõbe- ja ksenoonlambid, suure võimsusega vesijahutusega või väikese võimsusega õhkjahutusega laserid või dioodlaserid), ADC; Analoog-digitaalmuunduri süsteem, võimendussüsteem ja arvuti analüüsimiseks. Andmete kogumine on protsess, mille käigus proovidelt kogutakse andmeid voolutsütomeetri abil. Seda protsessi vahendab arvuti, mis on ühendatud voolutsütomeetriga. Arvutis olev tarkvara analüüsib arvutisse voolutsütomeetrist sisestatud teavet. Tarkvaral on ka võime reguleerida voolutsütomeetri juhtimise katse parameetreid.

Mis on FACS?

Voolutsütomeetria kontekstis on fluorestsents-aktiveeritud rakkude sortimine (FACS) meetod, mida kasutatakse bioloogiliste rakkude segu proovi eristamiseks ja sorteerimiseks. Rakud eraldatakse kahest või enamast mahutist. Sorteerimismeetod põhineb raku füüsikalistel omadustel, mis hõlmavad raku valguse hajumist ja fluorestsentsi omadusi. See on oluline teaduslik tehnika, mida saab kasutada usaldusväärsete kvantitatiivsete ja kvalitatiivsete tulemuste saamiseks igast rakust eralduvate fluorestsentssignaalide kohta. FACS-i ajal oli algselt eelnevalt saadud rakusegu; suspensioon suunatakse kiiresti voolava kitsa vedelikuvoolu keskele. Vedeliku vooluhulk on konstrueeritud nii, et suspensioonis olevad rakud eraldatakse iga kambri läbimõõdu alusel. Suspensiooni voolule rakendatakse vibratsioonimehhanismi, mille tulemuseks on üksikute tilkade moodustumine.

Süsteem on kalibreeritud, et luua ühe lahtriga üks tilk. Vahetult enne tilkade moodustumist liigub voolususpensioon mööda fluorestsentsi mõõtmise seadet, mis tuvastab iga raku omaduse. Tilkade moodustumise kohale pannakse elektriline laadimisrõngas, mis enne fluorestsentsi intensiivsuse mõõtmist indutseeritakse rõngale. Kui tilgad on suspensioonivoolust moodustunud, jääb tilkadesse laeng, mis siseneb elektrostaatilisse läbipainde süsteemi. Süüdistuse järgi suunab süsteem tilgad erinevatesse konteineritesse. Laenu rakendamise meetod varieerub vastavalt FACS-is kasutatavatele erinevatele süsteemidele. FACS-is kasutatavaid seadmeid tuntakse fluorestsents-aktiveeritud rakusorteerijana.

Milline on voolutsütomeetria ja FACS-i sarnasus?

  • Voolutsütomeetria ja FACS on välja töötatud rakkude eristamiseks vastavalt nende optilistele omadustele.

Mis vahe on voolutsütomeetrial ja FACS-il?

Voolutsütomeetria vs FACS
Voolutsütomeetria on metoodika, mida kasutatakse rakkude heterogeense populatsiooni analüüsimisel vastavalt rakkude erinevatele molekulide pinnale, suurusele ja mahule, mis võimaldab uurida üksikuid rakke.FACS on protsess, mille käigus rakkude proovisegu sorteeritakse vastavalt nende valguse hajumise ja fluorestsentsi omadustele kahte või enamasse mahutisse.

Kokkuvõte - voolutsütomeetria vs FACS

Rakk on kõigi elusorganismide põhiline struktuurne ja funktsionaalne üksus. Rakkude sorteerimine on protsess, mille käigus rakud eraldatakse ja eristatakse vastavalt rakusisesetele ja rakuvälistele omadustele eri kategooriatesse. Voolutsütomeetria ja FACS on kaks olulist meetodit rakkude sorteerimisel. Mõlemad protsessid on välja töötatud rakkude eristamiseks vastavalt nende optilistele omadustele. Voolutsütomeetria on metoodika, mida kasutatakse rakkude heterogeense populatsiooni analüüsimisel vastavalt rakkude erinevatele molekulide pinnale, suurusele ja mahule, mis võimaldab uurida üksikuid rakke. FACS on protsess, mille käigus rakkude proovisegu sorteeritakse vastavalt nende valguse hajumise ja fluorestsentsi omadustele kahte või enamasse mahutisse. See on erinevus voolutsütomeetria ja FACSi vahel.

Laadige alla voo tsütomeetria vs FACS-i PDF-versioon

Selle artikli saate alla laadida PDF-vormingus versiooni ja seda võrguühenduseta otstarbel kasutada vastavalt tsitaatide märkusele. Laadige alla PDF-versioon siit. Voolutsütomeetria ja FACS-i erinevus

Viide:

  1. Voolutsütomeetria (FCM) / FACS | Fluorestsents-aktiveeritud rakkude sortimine (FACS). Juurdepääs 22. septembril 2017. Saadaval siin Ibrahim, Sherrif F. ja Ger van den Engh. “Voolutsütomeetria ja rakkude sortimine.” SpringerLink, Springer, Berliin, Heidelberg, 1. jaanuar 1970.. Juurdepääs 22. septembril 2017. Saadaval siin

Pilt viisakalt:

  1. 'Tsütomeeter' By Kierano - Oma töö, (CC BY 3.0) Commons Wikimedia vahendusel 'Fluorestsents-assisteeritud rakkude sorteerimine (FACS) B'By SariSabban - Sabban, Sari (2011) In vitro mudelisüsteemi väljatöötamine Equus caballuse interaktsiooni uurimiseks IgE oma kõrge afiinsusega FcεRI retseptoriga (doktoritöö), Sheffieldi ülikool, (CC BY-SA 3.0) Commons Wikimedia kaudu